Recolha e criopreservação de embriões de cabras de raça serpentina

Abstract

Introdução e Objetivos: No âmbito do programa de Conservação e Melhoramento Genético da raça Serpentina, foi implementado um protocolo de estimulação ovárica e ovulação múltipla para recolha e criopreservação de embriões produzidos in vivo. O objetivo desta atividade visava a conservação da biodiversidade genética, em linha com as normas definidas para o Banco Português de Germoplasma Animal (BPGA), que promove a sustentabilidade reprodutiva e a preservação de raças autóctones. Os procedimentos incluíram protocolos de sincronização de cios, superovulação com FSH/LH e inseminação artificial (cervical e intrauterina por laparoscopia), seguidos de recolha, avaliação e criopreservação de embriões. Metodologia e Resultados: Os procedimentos foram realizados em duas sessões distintas, com dois grupos de cabras, provenientes de diferentes explorações (Grupo 1; n=12; e Grupo 2; n= 10). A sincronização consistiu na aplicação de dispositivos intravaginais com progesterona (dia 0; CIDR ovis®) durante 11 dias, e administração de cloprostenol no dia 9 (150 µg IM SID, Estrumate®). O tratamento superovulatório teve início no dia 9, através da administração de FSH/LH (500 UI IM SID; Pluset®), durante três dias em doses decrescentes (250UI, 150UI, 100UI, IM SID). No dia 12 foi induzida a ovulação (0.004mg, IM, SID, Receptal®). A deteção de cios iniciou-se no dia 12, 24h após retirada do CIDR, tendo a totalidade dos animais manifestado comportamento de cio entre as 9 e as 15 h desse dia sendo realizada uma primeira inseminação artificial (IA) com sémen fresco, por via cervical com uma dose de 200 milhões de espermatozoides móveis. No dia 13 foi efetuada pela manhã uma IA intrauterina por laparoscopia (dose seminal de 50 milhões espermatozoides móveis) e durante a tarde uma segunda IA por via cervical idêntica à primeira. A recolha de embriões foi realizada por laparotomia abdominal ventral, sob anestesia geral, 8 dias após a remoção do CIDR pela técnica de lavagem por fluxo retrógrado com recurso a um cateter de Foley. Os embriões recolhidos foram identificados e classificados de acordo com o manual da IETS (Sociedade Internacional de Transferência de Embriões), quanto ao estadio de desenvolvimento (mórula, blastocisto) e qualidade (1-excelente a 4-degenerado). Posteriormente, foram crio preservados por congelação lenta de acordo com o protocolo descrito por Bettencourt et al., 2009. As cabras do grupo 1, apresentavam uma idade média de 3,5 anos e uma condição corporal 3,5. A totalidade dos animais apresentou uma resposta à estimulação ovárica (≥ 4 Corpos Lúteos; CL) com uma média de 14,4 CL por cabra. Foram recolhidos e crio preservados 91 embriões de 10 cabras, com uma média de 9,1 embriões por cabra, resultado de uma taxa de recuperação média de 59%. Deste total, 50 foram mórulas das quais, 41 de grau 1 e 9 mórulas de grau 2. Os restantes embriões recolhidos foram 41 blastocistos, 25 classificados como blastocistos grau 1, 4 blastocistos grau 2, 5 blastocistos expandidos grau 1 e 7 jovens blastocistos grau 1. Nas cabras do grupo 2 observou-se uma grande disparidade etária com idades compreendidas entre 2 e 13 anos, com uma idade média de 4,8 anos e com condição corporal média de 3,5. Das 10 cabras intervencionadas, sete obtiveram uma resposta à estimulação ovárica, com uma média de 21 CL por cabra e três não responderam ao tratamento. Das cabras com resposta superovulatória só foi possível recolher e crio preservar embriões de 5 cabras, num total de 52 embriões com uma média de 10,4 embriões por cabra, resultado de uma taxa de recuperação de 50%. Foram recolhidas no total 28 mórulas, sendo 17 mórulas de grau 1, 6 mórulas de grau 2, 1 mórula de grau 3 e 4 mórulas compactas grau 1. Os restantes 24 embriões recolhidos eram blastocistos, sendo que 8 blastocistos eram de grau 1, 1 blastocisto grau 2, 11 blastocistos expandidos grau 1 e 4 jovens blastocistos grau 1. Principais Conclusões: Os resultados obtidos demonstraram a eficácia dos protocolos seguidos na indução de ovulações múltiplas, recolha e criopreservação de embriões na raça caprina Serpentina. Permitem ainda realçar, através da variação dos rendimentos das duas sessões, a importância na escolha das fêmeas dadoras, em termos etários, condição corporal e do seu historial reprodutivo, de forma que estes fatores não afetem os resultados e a viabilidade económica deste procedimento. Estas ações representam um passo significativo para a preservação genética da raça, alinhando-se aos objetivos do Banco de Germoplasma Português de promover a biodiversidade e a sustentabilidade reprodutiva das raças autóctones.